Указанный метод хроматографического разделения пчелиного яда на компоненты оказался очень удобным не только для анализа яда, но и для промышленного (препаративного) получения этих компонентов. Для этого необходимо лишь увеличить объем колонок и скорость пропускания через них раствора, что, в свою очередь, можно осуществить, прикладывая высокое давление на вход колонки. На этих принципах создан метод «Высокоэффективная жидкостная хроматография высокого давления». Именно этим методом сегодня получают чистые фракции (компоненты) пчелиного яда. Разумеется, метод сложен и дорог, о чем можно судить по той цене, по которой продают пчелиный яд и его компоненты на мировом рынке. Так, американская фирма «Сигма», продавая 1 г пчелиного яда за 242 доллара США, оценивает мелиттин яда в 155 долларов за 25 мг, а~апамин — в 307 долларов за 5 мг.
Для экспресс-анализа полученного на пасеке пчелиного яда, можно воспользоваться предложенным нами методом апитокситографии, указанным выше.
Определение качества сырья, содержащего пчелиный яд, апитоксиавтографическим методом осуществляется по следующей схеме.
Сырье, содержащее пчелиный яд в сухом виде, в количестве от 50 до 500 мкг наносят (распыляют) на фотографическую эмульсию, предварительно обработанную активным рассеянным светом в течение 30 с — 3600 с и смоченную водой. Фотоэмульсию с нанесенным сырьем выдерживают 60-300 с и затем обрабатывают в растворах стандартного проявителя и фиксажа до появления ярко выраженного контраста. При наличии в сырье пчелиного яда, на поверхности фотоэмульсии регистрируются следы пчелиного яда в виде пятен низкой оптической плотности.
‘ Для количественного определения яда готовят шкалу автографов пчелиного яда, по которой путем визуального сравнения с автографом сырья можно определить содержащееся в нем количество пчелиного яда. Минимальная чувствительность способа — 50 мкг яда. При меньшем содержании яда в сырье не удается визуально обнаружить его автограф. Предельная максимальная чувствительность способа — 500 мкг яда. При большем содержании яда в сырье светлые пятна — автографы сливаются, что препятствует количественному определению яда в сырье. Шкала автографов для количественного определения яда изготавливается следующим образом.


Страницы: 1 2 3 4 5