Необходимо отметить, что разработка препаратов с пчелиным ядом в нашей стране шла достаточно интенсивно. Часть из них не выдержала испытаний на доклиническом этапе, выпуск других был прекращен из-за отсутствия приемлемой нормативно-технической документации. Сегодня в Фармакопее России имеются лишь два отечественных препарата — Апифор и Унгапивен, а также ввозимые из-за рубежа Апизартрон и Вирапин.
Трудности вышеуказанной нормативно-технической характеристики лекарственных средств связаны, прежде всего, с отсутствием достаточно надежных методов стандартизации и определения активности пчелиного яда в готовых формах. Это, в частности, видно и из того, что существующие средства, в том числе Апизартрон и Вирапин стандартизируют не по активности яда, а по содержанию остальных ингредиентов препарата. Укажем, что в состав известных мазей с пчелиным ядом входят вспомогательные вещества такие, как камфора, мелилсалицилат, масло терпенное, эмульгаторы и др., которые являются традиционными мазевыми добавками. Однако, в мазях с пчелиным ядом эти добавки не улучшают, а ухудшают их ценность. Так, Батовой (1988) было показано, что содержание в существующем составе мази Агапартрон эмульсионной основы и эфирных масел приводит к инактивации ферментов яда. С другой стороны, препараты с очищенным, ;шо-филизированным пчелиным ядом, также неполноценны, так как лишены активности цельного, нативного яда. Большинство из выпускающихся сегодня лекарственных средств содержат лиофилизп-рованный или кристаллизованный яд. Ясно, что в процессе обработки, необходимой для кристаллизации или лиофилнзацнн, часть полезных компонентов яда инактивируется, что уменьшает терапевтическую ценность лекарственного средства. На по указывают практики Порядин (1958), Лудянский (1990), которые показали, что изученные препараты по своей эффективности уступают ужалениям живыми пчелами.
Таким образом, при приготовлении препаратов яда возникает проблема, с одной стороны, избавиться от некоторых нежелательных свойств цельного яда (например, аллергентность), а с другой — сохранить в препарате возможно более полно свойства натив-ного яда.
Решение вышеназванной проблемы привело к разработке нового препарата — мази с пчелиным ядом, получившей название «Ун-гапивен» (унг — мазь, апи — пчела, вен — яд), выполненной совместными усилиями кафедры физиологии и биохимии человека и животных Нижегородского университета и кафедры технологии лекарств Латвийской медицинской академии (А.С. СССР № 1547104, с приоритетом от 21.10.84). Нами предложена мазь, содержащая полноценный пчелиный яд на водорастворимой полимерной основе. Важно отметить, что технология приготовления мази обеспечивает сохранение биологической активности наиболее важных ферментов яда — фосфолипазы А и гиалуронидазы в течение 4-х лет. Вместе с тем была разрешена и другая проблема — разработаны высокочувствительные методы количественного определения наиболее важных компонентов яда. Это позволило разработать соответствующую нормативно-техническую документацию как на сырье — пчелиный яд, так и на лекарственную форму. В результате мы имеем сегодня ГОСТы на яд и препарат в виде утвержденных Фармакопейным комитетом МЗ СССР в 1989-90 гг. Фармакопейных статей: ФС 42-2683-89 «Яд пчелиный» и ВФС 42-1935-89 «Мазь Унгапивен», замененной недавно на ФС 42-3009-94.
Проведенное доклиническое изучение мази показало, что она имеет ряд преимуществ перед известными средствами, в том числе и содержащими пчелиный яд (Апизартрон, Вирапин), относительно безвредна.
Клинические испытания мази Унгапивен были проведены в стационарах Военно-медицинской Академии им. СМ. Кирова, кафедры нервных болезней МОЛГМИ, НИИ ревматологии АМН СССР, неврологии АМН СССР и др. В результате испытаний было установлено, что мазь проявляет отчетливое терапевтическое действие в 60-80% случаев лечения больных. Наиболее эффективен оказался при острых процессах — миозитах, люмбаго: в первые 3-4 дня втираний мази отмечалось уменьшение болевой чувствительности, увеличение объема активных движений в поясничном отделе, снижение симптомов напряжения. Менее эффективным был препарат при хронических спондиллогенных заболеваниях позвоночника, невралгии тройничного нерва, травматических арталгиях. При из-
мерении суточной экскреции адреналина, являющейся косвенным показателем уменьшения болевых синдромов, установлено уменьшение экскреции после курса втираний Унгапивена. В ходе испытаний было отмечено, что при нанесении и всасывании мази проявлялось легкое покраснение кожных покровов в месте втирания, сопровождающееся ощущением тепла. Для получения положительного клинического эффекта в отдельных случаях было достаточно однократного втирания мази, но эффект был кратковременным и длился 2-3 часа. Для получения более стойкого эффекта приходилось применять препарат курсом в течение 5-7 дней. Отмечены единичные случаи возникновения аллергических реакций на мазь, которые проходили самостоятельно после отмены препарата.
Интересным представляется выявленный в ходе клинических испытаний эффект восстановления нервно-мышечного аппарата у спортсменов при глубоких степенях его утомления, существенно превосходящий аналогичный эффект Апизартрона.
На основании проведенных клинических испытаний Фармакологический комитет МЗ СССР разрешил медицинское применение Унгапивена у взрослых в качестве местного противовоспалительного и обезболивающего средства и его промышленный выпуск.
Еще большие трудности технологии, по сравнению с мазями, возникают при разработке инъекционных лекарственных форм с пчелиным ядом. Здесь, кроме того, что необходимо сохранить активность компонентов яда, необходимо учитывать потери от стерилизации препарата. Вместе с тем и сама сохранность водного раствора затруднительна, так как водные растворы яда весьма нестойки и быстро подвергаются загниванию (Артемов с соавт., 1967). Именно поэтому выпускающийся Апизартрон для инъекций расфасован в две ампулы, одна из которых содержит сухой лиофи-лизированный яд, а другая — воду для инъекций, а смешивание — растворение производят непосредственно перед применением. Лио-филизация, которая в некоторой степени заменяет стерилизацию препарата, с другой стороны, может играть и отрицательную роль. В частности, показано, что при этом пчелиный яд и особенно его фосфолипаза А проявляют повышенную аллергентную активность.
Исходя из вышеизложенного, нами (совместная разработка Нижегородского университета и Латвийской медицинской академии) недавно был разработан состав стабильного раствора пчелиного яда для инъекций без его лиофилизации — Солапивен (сол — раствор, апи — пчела, вен — яд). Был найден оптимальный раствори-
теть, обеспечивающий сохранение ферментативной активности яда, и подобраны соответствующие стабилизаторы. Проведенные после 2-х лет хранения раствора испытания фармакологического средства показали сто высокую эффективность, не уступающую пативиому пчелиному яду. Это было докачано экспериментами как на изолированных препаратах, так и на целостном организме животных. На изолированной кишке морской свинки было установлено, что перфузия раствором препарата повышала тонус кишки и уменьшала ее реакцию на ацетилхолин в той же степени, что и на-тивный пчелиный яд. В экспериментах на наркотизированных кошках было показано, что внутривенное введение препарата в дозе 0,05 мг/кг (расчет па содержание в препарате яда-сырца) приводило к падению артериального давления с 135±8 мм рт.сг. до 110+10 мм рт.сг. с восстановлением до исходного уровня через 5-7 минут. Одновременно происходило увеличение амплитуды периферической реограммы, свидетельствующей о падении сосудистого тонуса, и повышение амплитуды электрокардиограммы (рис. 19). Аналогичные реакции были зарегистрированы при введении животным пативного пчелиного яда в тех же дозах.
Специфическую активность разработанного средства изучали на моделях разных патологических состоянии организма. В одной
из них ставилось целью изучить противоревматическую активность нового препарата. Моделировался адъювантный артрит у крыс. Через несколько часов в месте введения полного адъюванта Фрсйнда (субплантарно) развивалась воспалительная реакция в виде гиперемии кожных покровов, отека. Реакция прирессировала в течение 5-7 дней. На 10-12 день после введения ПАФ появлялись видимые поражения суставов за счет разрастания синовиальной оболочки, образующей «паннус». Кроме наблюдения за животными, через 20, 40 и 60 дней после введения ПАФ проводился пато-морфологический и гистологический анализ суставов. Животным опытной группы ежедневно вводился Солапивен в дозе 0,05 мг/кг, контрольной — физиологический раствор с основой препарата.
При наблюдении за животными было установлено, что, в отличие от контрольных крыс, у леченных пчелиным ядом животных не нарушалась функция передвижения. При вскрытии на 20-й день суставной сумки скакательных суставов задних лап у контрольных животных наблюдалось скопление серозно-фиброзного экссудата, отсутствующее у опытных крыс.
Еще большее различие в развитии патологического процесса у опытных и контрольных групп животных показано на поздних стадиях. Дерматиты, конъюнктивиты у леченых крыс отмечались только к 40-му дню, после чего проходили. У контрольных животных они наблюдались с 10-го по 50-й день эксперимента. Отечность лап у них сохранялась вплоть до последнего дня опыта. Вскрытие суставной сумки через 40 дней после введения ПАФ показало скопление серозно-фиброшого экссудата в суставной щели нелеченых крыс и полное его отсутствие у леченых. При исследовании препаратов, сделанных в сагиттальном разрезе через сустав и кости задних конечностей, отмечены участки эпителнондной гра-нулемы в синовиальной оболочке контрольных животных, которые отсутствовали у опытных. Отмечено снижение количества фибробластов и гистиоцитов в субинтимальной ткани и невыраженный очаговый миозит у леченых животных по сравнению с явно выраженной пролиферацией фибробластов и гистиоцитов, а также диффузным миозитом у контрольных, нелеченых животных.
Из полученных результатов следует, что инъекционный препарат Солапивен обладает выраженными противовоспалительными и пролиферативпыми свойствами, присущими нативному пчелиному яду.
Клинические испытания препарата проведены на базе неврологических отделении областной клинической больницы им. Семаш-
ко и областной клинической больницы № 3 в течение 1992-1993 гг. (Н. Новгород). Изучался Солапивен для инъекций в ампулах, изготовленный экстгериментальным заводом института органического синтеза АН Латвии (серии № 01-030491). Препарат применялся в комплексной терапии больных двух категорий: заболеваниями периферической нервной системы и сосудистыми заболеваниями головного мозга.
Методика испытаний
Перед лечением больных проводили биологическую пробу — внутрикожно в области левого предплечья вводили 0,1 мл 0,06% раствора Солапивена. Через сутки проводили анализ мочи. При появлении в моче белка, сахара или эритроцитов пробу считали положительной, и лечение не назначалось. Оценивалась также местная тканевая реакция: положительной считали реакцию развития местной гиперемии с отеком тканей в диаметре более 3 см и наличие лимфангоита. В процессе лечения следили за возможными осложнениями аллергического характера и побочным действием препарата.
Инъекции препарата проводили через 1-2 дня при суммарном числе процедур от 4 до 8. Лечение прекращали по достижении эффекта. В переводе на дозы препарата это составило от 0,2 до 3 мл 0,06% раствора, или, если перевести на пчелоужаления — от 1 до 18 пчел.
Зоны инъекций: болевые точки(‘триггерные зоны»), точки акупунктуры в соответствии с правилами китайского иглоукалывания. При сосудистых заболеваниях головного мозга — точки веге-тотропные, общего действия. При заболеваниях периферической нервной системы — точки местного действия, локально-сегментарные точки и отдаленные точки. В соответствии с локализацией точек акупунктуры Солапивен вводился подкожно или внутримышечно.
Результаты испытаний
1. Заболевания сосудистые головного мозга. Всего пролечено 29 больных (12 мужчин и 17 женщин) в возрасте от 34 до 65 лет. Диагноз начальных проявлений недостаточности кровоснабжения мозга (НПНКМ) был установлен у 18 больных, начальной дисцирку-ляторной энцефалопатии (ДЭ) — у 11 больных. Недостаточность кровоснабжения выявлялась преимущественно в системе вертеб-рально-базилярных артерий (ВБА) и протекала на фоне шейного
остеохондроза, начального атеросклероза мозговых и коронарных сосудов, гипертонической болезни или их сочетания.
Типичными жалобами больных с НПНКМ были: частые или постоянные головные боли, чувство тяжести в затылочной области, шее, нарушения сна, снижение работоспособности, иногда боли в сердце. В неврологическом статусе выявлялась эмоциональная и вегетативная неустойчивость, болезненность шейных паравер-тебральных и вегетативных точек, слабость конвергенции (у 3 больных), симптом Тремнера (у 4 больных). На глазном дне у 9 больных выявлена начальная ангиопатия сетчатки, на РЭГ явления дистонии. На спондилограммах шейного отдела (7 больных) признаки остеохондроза разной степени выраженности. ЭЭГ — без очаговых и пароксизмальных нарушений.
У больных ДЭ ведущим также являлся цефалгический синдром, боли носили упорный характер, отмечалась четкая метеозависимость. При обследовании выявлялись мнестические нарушения, слабость конвергенции глазных яблок, снижение слуха (у 4 больных), ограничение движений в шейном отделе из-за болей. На глазном дне — ангиопатия сетчатки, на РЭГ — торпидность реакции на нитроглицерин, снижение эластичности сосудистой стенки (у 6 больных). Липиды крови были повышены у 8 больных.
После лечения препаратом Солапивен в сочетании со стандартной терапией (не включающей анальгетики) значительное улучшение отмечалось у 8 больных с НПНКМ и 2 больных с ДЭ. У этих больных исчезали головные боли, боли в сердце. Улучшение регистрировалось у 7 больных с НПНКМ и 5 больных с ДЭ. У них уменьшались цефалгии, головокружения. Отсутствие эффекта было определено у 3 больных с НПНКМ и 4 больных с ДЭ. Таким образом, эффект улучшения был выявлен у 15 больных из 18 с НПНКМ (83%) и у 7 больных из 11 с ДЭ (64%). В контрольной группе, не получавшей Солапивен, улучшение отмечено у 7 из 12 больных с НПНКМ (58%) и у 2 из 6 больных с ДЭ (34%).
2. Заболевания периферической нервной системы. Препаратом Солапивен пролечено 52 больных в возрасте 32-76 лет. Распределение по нозологическим формам: невралгия тройничного нерва, остеохондроз поясничного, грудного и шейного отдела с выраженными болевыми мышечно-тоническими синдромами, деформирующий остеоартроз, артроз тазобедренных, коленных суставов, эпиконди-лит, плече-лопаточный периартроз.
В результате проведения биологических проб было установлено, что Солапивен дает меньшее число аллергических проявлений
у больных по сравнению с пчелоужалениями. В 2-х случаях из 52 пришлось отказаться от апитерапии из-за появлений местной положительной реакции, и в 1 случае наблюдалась общая реакция организма (лихорадка, повышение температуры до 38°С), прекратившаяся после введения димедрола.
В результате лечения было установлено, что Солапивен обладает безусловным эффектом обезболивания, особенно выраженным при мышечно-тонических и нейродистрофических синдромах, обусловленных остеохондрозом. Во всех случаях лечения препаратом наблюдалось улучшение общего самочувствия, нормализовался сон, настроение, повышался общий тонус организма.
Лишь в 2-х случаях не было получено четкого терапевтического эффекта — при дискогенном радикулите (видимо, из-за компрессии корешка). В остальных случаях вместе с аналгетическим проявлялся и противовоспалительный эффект, что позволяло заканчивать процедуры с хорошим терапевтическим эффектом.
Из полученных результатов следует заключить, что новое лекарственное средство обладает выраженным обезболивающим и противовоспалительным эффектами со всеми признаками натив-ности пчелиного яда. Более того, больные отмечают меньший болевой эффект при инъецировании препарата по сравнению с пчелоужалениями. Это, видимо, связано с отсутствием в препарате низкомолекулярных летучих веществ пчелиного яда, обладающих алгогенным эффектом. Уменьшение аллергических проявлений на препарат, видимо, связано с уменьшением в нем содержания аллергенов, что позволяет организму без «иммунных издержек» вступить во взаимодействие с лекарством. Вместе с тем укажем на определенное терапевтическое преимущество Солапивена: по сравнению с пчелоужалениями курс апитерапии существенно укорачивается. Мы полагаем, что это может быть связано с появившейся возможностью более точно (по горизонтали, вертикали и глубине) инъецировать раствор пчелиного яда через иглу в акупунктурную точку.
Вышеизложенное позволяет сделать вывод, что препарат Сола-пивеи обладает выраженными терапевтическими свойствами, хорошо переносится больными, что позволяет рекомендовать его для терапии заболеваний нервной системы как обезболивающее и противовоспалительное средство.
Ниже приводится инструкция по применению разработанной мази «Унгапивен», разрешенной к применению.
Инструкция по применению Унгапивена
Одобрена Фармакологическим комитетом МЗ СССР 26 октября 1988 г.
Унгапивен — мазь, содержащая в качестве действующего вещества пчелиный яд и его ферменты — гиалуронидазу (не менее 40 МЕ/г) и фосфолипазу А (не менее 55 МЕ/г), на водорастворимой мазевой основе. В медицинской практике применяется в виде мази белого цвета с сероватым или желтоватым оттенком.
Фармакологические свойства
Унгапивен обладает холинолитическими свойствами, присущими пчелиному яду, оказывает местное и центральное анальгетиче-ское и противовоспалительное действие. Наличие ферментов гиа-луронидазы и фосфолипазы А способствует проникновению других биологически активных компонентов пчелиного яда через кожу.
Показания к применению
Унгапивен применяют при артритах различной этиологии, артрозах, остеохондрозе, радикулитах с корешковым синдромом, ми-алгии, миозите, люмбаго.
Способ применения и дозы
Унгапивен применяют наружно, перед нанесением мази место аппликации промывают теплой водой. Мазь тонким слоем наносят на влажную поверхность тела, что способствует более быстрому всасыванию активных веществ. Втирание проводят в течение 3-5 минут.
Препарат применяют 1-3 раза в день. Курс лечения от 1 до 4 недель.
После применения мази необходимо тщательно вымыть руки, чтобы избежать попадания мази на слизистые оболочки глаз.
Побочное действие
При применении Унгапивена возможна аллергическая реакция. У людей, склонных к аллергии на пчелиный яд, при нанесении мази на значительную поверхность может наблюдаться в месте нанесения гиперемия, повышение температуры и отек кожи. Возможна также общая аллергическая реакция, которая может выражаться в недомогании, ознобе, головной боли, тошноте, рвоте, повышении температуры. В этих случаях проводят лечение противоаллергическими (антигистаминными) средствами.
Противопоказания
Применение Унгапивена противопоказано при индивидуальной непереносимости на препарат, заболеваниях почек, печени и поджелудочной железы, диабете, новообразованиях, туберкулезе, тяжелых инфекционных заболеваниях, сепсисе и гнойных (острых) заболеваниях кроветворной системы, недостаточности кровообращения с декомпенсацией, психических заболеваниях, кахексии, сахарном диабете, заболеваниях коры надпочечников, беременности.
Форма выпуска
Унгапивен выпускают в виде мази в тубах по 25 г или банках из оранжевого стекла по 25 г или 50 г.
Условия хранения
Препарат следует хранить в прохладном, сухом, защищенном от света месте.
Вышеприведенная инструкция не отменяет общую инструкцию по применению апитерапии, одной из первых разработанную в нашей стране и утвержденную МЗ СССР в 1959 году. В указанной инструкции более широко представлены показания для проведения апитерапии пчелоужалениями:
- ревматические заболевания (ревматические полиартриты, ревматические заболевания мышц, ревмокардит);
- неспецифические инфекционные полиартриты;
- деформирующий спондилоартроз;
- заболевания периферической нервной  системы  (пояснично-крестцовый радикулит, воспаление седалищного нерва, бедренного, лицевого и других нервов, межреберные невралгии, полиневриты и др.);
- трофические язвы и вялогранулирующие раны;
-  сосудистые хирургические заболевания (тромбофлебиты без гнойного процесса, эндартериоз, атер о склеротические поражения сосудов конечностей);
- воспалительные инфильтраты (без нагноения);
- бронхиальная астма;
- мигрень;
- гипертоническая болезнь I и II степени;
- ириты и иридотиклиты.
Согласно указанной инструкции, лечение начинают с пробных ужалений для того, чтобы выяснить, какова реакция больного на пчелиный яд. Первая проба заключается в том, что на кожу пояс-
ничной области наносится ужаление одной пчелой и жало извлекается из кожи через 10-15 секунд. На следующий день проверяется моча на белок и сахар. После этого проводится вторая проба — на кожу той же области вновь производят ужаление одной пчелой и жало извлекается через 1 минуту. Вновь проверяется моча на белок  и сахар. В случае, если после двух биологических проб в моче не появляется белок и сахар и нет резко выраженной аллергической реакции или общих явлений отравления, можно проводить апитерапию.
Лечение проводят по циклам. Цикл лечения состоит из 10-15 процедур ужалений пчелами ежедневно в течение 10-15 дней или 2 раза в неделю в течение 1,5 месяцев. При необходимости цикл повторяется через 1,5-2 месяца.
Место ужалений и их количество определяются врачом в зависимости от заболевания. При ревматическом неспецифическом инфекционном полиартрите, деформирующем споидилоартрозе, пче-лоужаления производятся в области пораженных сосудов и по ходу позвоночника. Сначала делается 2-5 ужалений с увеличением их до 10-20 за процедуру. При заболеваниях периферической нервной системы пчелоужаление производится по ходу поражения нервов, а при пояснично-крестцовом радикулите, кроме этого, на пояснич-но-крестцовую область (8-12 пчелоужалений за процедуру). При эндартериозе и атеросклеротическом поражении сосудов — по хо- ду сосудов пораженной конечности. При тромбофлебитах — над тромбированными венами, при вяло гранулирующих ранах и трофических язвах — в 5 см от края раны или язвы, а также по ходу чувствительных ветвей нервов данной области. Количество ужалений уменьшается до 5-8 за процедуру. Еще меньше пчелоужалений следует проводить при гипертонической болезни, бронхиальной астме, иритах и иридотиклитах — не более 2-4 за сеанс. При гипертонии ежедневные процедуры не рекомендуются. При иритах и иридотиклитах ужаления производятся в височную область.
Женщинам и лицам пожилого возраста, а также детям количество ужалений должно быть уменьшено.
После каждого ужаления жало выдерживается в коже I минуту, после чего удаляется. Общее количество ужалений за цикл лечения не должно превышать 200-250. В ряде случаев апитерапию целесообразно сочетать с медикаментозным лечением, физиотерапевтическими процедурами.
В названной инструкции очерчен также и круг противопоказаний к применению апитерапии:
- повышенная чувствительность к пчелиному яду, идиосинкразия,
- инфекционные заболевания,
- туберкулез,
- психические заболевания,
- болезни печени и поджелудочной железы в стадии обострения,
- заболевания почек, коры надпочечников,
- сепсис, острогнойные заболевания,
- декомпенсация сердечно-сосудистой системы,
- органические заболевания центральной нервной системы,
- общее истощение организма,
- болезни крови и кроветворной системы с наклонностью к кровотечениям,
- беременность.